师：同学们好。hello，好，请坐。今天我们在实验室继续学习植物的光合作用，今天来进行叶绿体色素的分离和提取。我们今天的第一个探究环节，是研究捕获光能的色素有哪些。大家可以看到，桌上给大家准备了新鲜的菠菜叶。那么，今天我们要用到一个小工具叫做研磨器，一会我会演示一下。大家从手里的菠菜叶中大概摘取2到3片就行，如果是大叶子，两片就够了，然后把它撕碎，装入到研磨器的外套桶里面。接下来，在里面加入少许碳酸钙。大家还记得碳酸钙在这里面的作用吗？
生：宋心怡：防止光合色素被植物液泡里面的酸所破坏。
师：对。然后，我们把研磨杆放到里面去。今天要用的提取液是无水乙醇，接下来用吸管往里面加入3毫升的无水乙醇。加好以后，把研磨器放在桌子上，用身体压在上面进行研磨。大家不用着急，一会儿会给大家时间操作。在研磨器的研磨头地方，大家应该注意到有凹凸不平的结构，它们的作用是帮我们增加研磨的力度，所以在这个实验中暂时不需要加二氧化硅，它的研磨效果很好。当你研磨的时候，如果感受到凹凸不平的感觉，就说明研磨力度可以了。接下来，把上盖打开，用移液器插好枪头，从里面吸700微升的液体到离心管里。好了，现在大家就可以看到，我们已经得到了叶绿体色素的粗提液，是比较浓郁的绿色。接下来我先把实验说完，大家别着急。接下来要做的实验二是色素的分离，我们要取滤纸片，用毛细管蘸色素提取液。把毛细管放在提取液里，就能看到色素提取液进入毛细管，然后在滤纸条上面画细线，尽可能多画几次，然后放入装有层析液的层析瓶中进行层析。好，同学们现在开始进行实验一和实验二的操作。
生：可以站起来。就是他不行就把那个拔出来。当然不是了，是这个。绿叶，这个。
师：大家暂时安静一下，先不讲话了。大部分同学已经开始进入等待层析的过程，前面还在划线的同学不用着急，可以继续划线。根据我们课堂所学，大家可以预测一会儿将会观察到什么样的结果？应该看到四条不同颜色的条带，从上到下依次是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。稍后等层析完成，我们再一起看大家的结果。现在在等待层析的过程中，可以往下进行第二个探究话题，也就是寻找光合色素捕获光能的证据。在这个环节下，我为大家设计了两个实验。其中实验3是观察菠菜叶绿体色素的吸收光谱。观察吸收光谱，大家再看看刚才拿到的两个色素粗提液，会发现它们的透光度不太好。这个粗提液经过了研磨器里面滤网的过滤，但还是有一些细小残渣，影响透光度。所以接下来要做的，就是让它变得澄清，去掉这些残渣。请大家向色素粗提液离心管里面加入等体积的无水乙醇。如果刚才能吸到700微升，就加700微升；如果量明显少，就少加一点。加好无水乙醇后，在管上做好标记，各组进行离心。王安然不加乙醇直接离，是吧？李思珊也不用加乙醇。那我们可以直接开离心机了。
生：（离心过程中的交流声音）看一下，多长时间？我刚才留了，应该再离一会儿，这个也不是。其他的。OK，然后还有别让他跨这个缝，离心离完了就坐下就行，这是你的，是吗？那我就用你的了，我放到比色杯里去了啊。还有吗？再给位置，刚才他那个不够。行，圣殿你留着吧。
师：好了，大家先回到自己的座位上，坐下来。是不是大部分同学已经做完离心了？正常情况下，大家应该观察到这样的一个结果。现在我想大家还记得，刚才有两名同学没有添加乙醇，直接离心，我们来看一下他们的结果。这是王安然的，大家能看出区别吗？这是没有加乙醇的，跟自己的比一比。我看不一样，这个还是绿多了。大家一块看一下屏幕。大家保持安静，没做完的可以接着做，但先不讲话了。看，没有加乙醇的王安然这组，上层清液不如其他同学那么绿，虽然澄清了，但不那么绿，说明什么？说明色素没有很好地溶解在上清里，而是进入到沉淀里面去了。那为什么加了乙醇就改变了这个结果呢？是不是增大了上层液体对于光合色素的溶解性？刚才我已经把前面两位同学提取的色素提取液放到比色杯里了，接下来到讲台上面来进行观察。作为对照，我的对照比色杯里面应该放什么呢？
生：用水。
师：对，应该用无水乙醇，要跟那边的溶剂相对应。我直接用吸管加入无水乙醇。田志辉你帮我关一下灯。我们这个装置是一个白炽灯的光源，前面有一个黑纸，上面有一道狭缝，光会穿透狭缝和比色杯里面的液体，再后面是一个光栅，我们透过光栅来进行观察，大家能看清楚吗？这是刚才透过光栅观察到的结果，帮我先把灯打开，谢谢。好，观察到现在还是能看清楚的。我想请同学来说一说，通过这个结果能得出什么样的结论？关俊义，你看到什么了？
生：这个左边的是色素提取液，然后右边是无水乙醇。发现这个左边的红光和蓝紫光被吸收，这一段和这一段明显少。
师：红橙区段和蓝紫段明显少，那说明什么呢？
生：说明这个叶绿素可以吸收红光和蓝紫光。
师：非常好，请坐。提取液里面主要成分就是叶绿素。叶绿体色素里面除了叶绿素，可能还含有胡萝卜素和叶黄素。大家再关注一下层析情况，如果已经跑开了，就可以把它拿出来。怎么样，能看到底下那两个吗？这个很清楚，非常好，放在这，我给大家看一下。大家看，这是刘慧媛的结果。看到上面的胡萝卜素，然后连叶黄素那部分都还能看得出来，这一段是胡萝卜素，这段是叶黄素，对吧？然后叶绿素a呈蓝绿色，叶绿素b呈黄绿色。大部分同学看到了自己的结果，有的同学结果比较明显，主要原因应该是转移色素的时候转移的量相对多一些；有些同学不那么明显，但也能看到上面的胡萝卜素和下面的两个叶绿素的条带。光合色素的吸收光谱，这是教材上的图片，跟我们今天所观察到的现象是一致的，能看到红橙和蓝紫有两个吸收高峰。接下来进行第四个实验，观察叶绿体色素的荧光特性。大家手里应该还有刚才的色素提取液，王安然这个你可以拿走，也可以试一下，只是量少一些。把澄清的色素提取液转移到玻璃试管里，大约2 - 3毫升就能看出效果。这里有蓝色的激光笔，因为刚才已经发现光合色素可以吸收蓝紫光。田志辉再帮我关一下灯，我把这个也关掉来看一下。首先给大家看一下，这支笔确实是蓝色的，这是光合色素提取液，我们来试一下，看到了吗？首先打不到墙上了，刚才可以打到墙上，但一旦透过光合色素，发现那边墙上没有影了。如果照试管上面空的地方，墙上是可以透过去的，但到这儿没有了，说明这个光被吸收了。然后从你们的角度能看到红色吗？